客として好きに振る舞ってくれて構わない、という気持ちが込められています。つまり、相手の要求を快く聞き入れるときのフレーズです。Go ahead. / Please do. とも言います。

＜SKIT＞

A：Do you mind if I have some coffee?

B：Be my guest.

A：コーヒーをいただいてもいいですか。

B：遠慮なくどうぞ。

『使える英会話鉄板表現 160』（コスモピア株式会社、浦島久著）より